Item
|
Osuna Oliveras, Sílvia
Swart, Marcel Agencia Estatal de Investigación |
|
|
Universitat de Girona. Departament de Química
Universitat de Girona. Institut de Química Computacional i Catàlisi |
|
| María Solano, Miguel Ángel | |
| 2021 February 12 | |
|
Enzymes are sophisticated biomacromolecules whose function is linked to its
three-dimensional structure and conformational dynamics. Therefore, the understanding of enzyme conformational dynamics can be exploited to enhance
enzyme efficiencies. First, we study alcohol dehydrogenase (ADH) enzymes in
order to investigate the molecular basis of the reversion of
enantioselectivity and thermo-adaptation displayed by laboratory-evolved
enzyme variants towards non-natural substrates. In second place, we study the
allosteric complex tryptophan synthase (TrpS) in order to decipher the
allosteric effects exerted by the protein partner and by the introduction of
mutations in laboratory evolved stand-alone enzyme variants. The study
follows with the development of a strategy based on cross correlation tools
in order to design stand-alone enzyme variants. Finally, the most promising
computational designs are tested experimentally confirming their superior
stand-alone activity. The studies gathered in this thesis emphasize the
relevance of considering the enzyme conformational dynamics in computational
enzyme engineering processes Els enzims són biomacromolècules sofisticades la funció de les quals està lligada a la seva estructura tridimensional i dinàmica conformacional. Per tant, la comprensió de la dinàmica conformacional dels enzyms es util per millorar la seva eficiència. Primer estudiem l’enzim alcohol deshidrogenasa (ADH) per investigar les bases moleculars de la reversió de l’enantioselectivitat i la termoadaptació que mostren les variants enzimàtiques desenvolupades al laboratori. En segon lloc estudiem el complex al·losteric triptòfan sintasa (TrpS) per desxifrar els efectes al·lostèrics que exerceix el soci proteic i la introducció de mutacions en variants enzimàtiques autònomes evolucionades al laboratori. L’estudi segueix amb el desenvolupament d’una estratègia basada en eines de correlació creuada per tal de dissenyar variants enzimàtiques autònomes. Finalment, es proven experimentalment els dissenys computacionals que confirmen la seva activitat autònoma. Els estudis recollits en aquesta tesi emfatitzen la rellevància de considerar la dinàmica conformacional enzimàtica en processos d’enginyeria computacionals d’enzims The projects of this thesis have been performed thanks to the financial support granted by: The Spanish MINECO for a PhD fellowship (BES-2015-074964), the Spanish MICINN for the project PGC2018-102192-B-I00 and the European Research Council (ERC) under the European Union’s Horizon 2020 research and innovation program (ERC-2015-StG- 679001) |
|
| application/pdf | |
| http://hdl.handle.net/10803/671771 | |
| http://hdl.handle.net/10256/19602 | |
| eng | |
| Universitat de Girona | |
|
info:eu-repo/grantAgreement/AEI/Plan Estatal de Investigación Científica y Técnica y de Innovación 2017-2020/PGC2018-102192-B-I00/ES/EVOLUCION COMPUTACIONAL DE ENZIMAS MEDIANTE LA EXPLORACION DE LA SUPERFICIE CONFORMACIONAL/ info:eu-repo/grantAgreement/EC/H2020/679001/EU/Network models for the computational design of proficient enzymes/NetMoDEzyme |
|
| ADVERTIMENT. Tots els drets reservats. L’accés als continguts d’aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, així com en activitats o materials d’investigació i docència en els termes establerts a l’art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l’autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el títol de la tesi doctoral. No s’autoritza la seva reproducció o altres formes d’explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d’un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s’autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i índexs. | |
|
Biocatalitzadors
Biocatalizadores Biocatalysts Enzims Enzimas Enzymes Energia Energía Energy Al·losteria Alostería Allostery Dinàmica conformacional Dinámica conformacional Conformational dynamics Enantioselectivitat Enantioselectividad Enantioselectivity 544 - Química física 577 - Bioquímica. Biologia molecular. Biofísica |
|
| Computational studies of the conformational landscape of allosteric and enantioselective enzymes | |
| info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
| DUGiDocs |
