Item
Llorens Duran, Rafael de
Peracaula Miró, Rosa |
|
Universitat de Girona. Departament de Biologia | |
Tabarés Carreras, Glòria | |
Als països desenvolupats, una de cada cinc persones morirà a causa del cà ncer. S’ha descrit que les cèl·lules canceroses presenten modificacions en els glicans presents a la superfÃcie cel·lular i aquesta glicosilació anòmala podria reflectir-se en les glicoproteïnes de secreció. Per aquest motiu es planteja l’estudi de la glicosilació de dues proteïnes de secreció en situació normal i tumoral: la ribonucleasa pancreática humana (RNasa 1) i l’antigen prostà tic especÃfic (PSA). La RNasa 1 és una glicoproteïna secretada majorità riament pel pà ncreas. S’ha desenvolupat un mètode immunològic per a detectar els nivells de RNasa 1 en sèrum. Malgrat la millora de la sensibilitat, respecte d’estudis anteriors, no s’han observat diferències significatives entre la concentració de RNasa 1 en sèrum de pacients control sans, afectats de neoplà sia pancreà tica, de pancreatitis o d’altres patologies. L’estudi de les estructures glucÃdiques de la RNasa 1, mitjançant assaigs immunològics, permet observar diferències importants en la glicosilació entre la situació normal i tumoral: Els antÃgens sialilats sLex i sLea només apareixen en la RNasa 1 de medi de cultiu de cèl·lules d’adenocarcinoma pancreà tic Capan-1 i MDAPanc-3 i l’antigen fucosilat Ley només apareix en la RNasa 1 de pà ncreas de donant. S’ha purificat la RNasa 1 secretada per la lÃnia MDAPanc-3, cosa que ha permès seqüenciar-ne les estructures glucÃdiques i comparar-les amb les de la RNasa 1 purificada del medi de les cèl·lules Capan-1 i de pà ncreas de donant, corroborant els resultats abans esmentats. L’antigen prostà tic especÃfic (PSA) és una glicoproteïna secretada principalment per la pròstata. Els seus nivells sèrics s’utilitzen actualment com a marcador del cà ncer de pròstata, però la seva especificitat no permet diferenciar clarament una situació benigna d’una maligna. La purificació i caracterització glucÃdica del PSA secretat per les cèl·lules de carcinoma prostà tic LNCaP mostren diferències molt clares amb la glicosilació que presenta el PSA purificat de plasma seminal de donant. Principalment, el PSA present en situació tumoral, purificat de les cèl·lules de carcinoma prostà tic, no conté à cid sià lic, però presenta nivells més alts de fucosilació que el PSA en situació normal. El PSA purificat de plasma seminal de donant sà que conté à cid sià lic. Aquests resultats s’han obtingut mitjançant assaigs immunològics amb detecció per lectines i s’han corroborat per seqüenciació glucÃdica. D’acord amb les estructures glucÃdiques que millor diferencien el PSA de situació normal i tumoral, s’ha portat a terme la caracterització glucÃdica de mostres biològiques que contenen PSA. S’han desenvolupat diferents assaigs immunològics de detecció per lectines o associats a l’activitat sialiltransferasa, amb un enriquiment previ en PSA per immunoadsorció indirecta o cromatografia per interacció tiofÃlica. Els resultats dels diferents assaigs permeten concloure que el PSA del sèrum de pacients de neoplà sia prostà tica presenten un contingut en à cid sià lic similar al del plasma seminal de donant, encara que són lleugerament menys sialilats. Aquests resultats s’adiuen amb els determinats sobre mostres de PSA purificat. La separació del PSA per electroforesi bidimensional mostra diverses formes amb pI à cid en el PSA de plasma seminal, explicades per la presència d’à cid sià lic. Es detecten formes de pI més bà sic que el teòric per al PSA en el secretat per les cèl·lules LNCaP, que correspon a formes pPSA. Al sèrum de pacients de neoplà sia prostà tica s’hi observen formes sialilades. Les proteïnes de secreció, RNasa 1 i PSA, es troben alterades a nivell glucÃdic en situació tumoral, cosa que podria ser d’utilitat per a finalitats diagnòstiques. | |
http://hdl.handle.net/2072/298812 | |
cat | |
Universitat de Girona | |
ADVERTIMENT. L’accés als continguts d’aquesta tesi doctoral i la seva utilització ha de respectar els drets de la persona autora. Pot ser utilitzada per a consulta o estudi personal, aixà com en activitats o materials d’investigació i docència en els termes establerts a l’art. 32 del Text Refós de la Llei de Propietat Intel·lectual (RDL 1/1996). Per altres utilitzacions es requereix l’autorització prèvia i expressa de la persona autora. En qualsevol cas, en la utilització dels seus continguts caldrà indicar de forma clara el nom i cognoms de la persona autora i el tÃtol de la tesi doctoral. No s’autoritza la seva reproducció o altres formes d’explotació efectuades amb finalitats de lucre ni la seva comunicació pública des d’un lloc aliè al servei TDX. Tampoc s’autoritza la presentació del seu contingut en una finestra o marc aliè a TDX (framing). Aquesta reserva de drets afecta tant als continguts de la tesi com als seus resums i Ãndexs. | |
Tesis i dissertacions acadèmiques
Ribonucleasa Glycosilation Cà ncer de pà ncreas Prostatic cancer Pancreatic cancer Cà ncer de pròstata Antigen prostà tic especÃfic Glicosilació Tumor markers Marcadors tumorals 577 - BioquÃmica. Biologia molecular. BiofÃsica |
|
Glicosilació aberrant en proteïnes de secreció com a marcadors tumorals | |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis | |
Recercat |